目的：研究安顺市无偿献血者血液采用ELISA检测结合核酸检测乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）以及人类免疫缺陷病毒（HIV）的结果分析。方法：选择安顺市中心血站2020年1月至2022年12月期间无偿献血者58670例作为检查筛查对象，对其血液进行HBV、HCV、HIV酶联免疫吸附实验方法（ELISA）筛查检测，对ELISA检测单试剂有反应性和无反应性的血液标本进行HBV-DNA、HCV-RNA和HIV-RNA核酸筛查检测。结果：在58670例无偿献血者血液标本的ELISA检测中产生HBsAg血清学双试剂有反应性90例，产生HCV血清学双试剂有反应性19例，产生HIV血清学双试剂有反应性23例，产生其他血清学有反应性112例；ELISA检测单试剂有反应性和未产生血清学反应性的样本数为58426例，进行混合检测出有核酸反应性的血液标本阳性率为0.202%，对混合检测有核酸反应性血液标本进行HBV-DNA、HCV-RNA和HIV-RNA的拆分检测，共检出58例反应性标本数，其阳性率为49.15%，总样本数阳性率为0.099%，其中HBV-DNA核酸反应性样本占比98.28%（57/58）、HCV-RNA核酸反应性样本占比为0%，HIV-RNA核酸反应性样本占比为1.72%（1/58）。58例核酸反应性样本中男性阳性率与女性对比，差异无统计学意义（P＞0.05）；41～55岁的核酸反应阳性率明显高于18～40岁的献血者（P＜0.05）。讨论：为无偿献血者的血液标本进行采用ELISA检测结合核酸检测更大可能避免漏检HBV、HCV以及HIV的血液标本，进一步提高了用血安全性；献血者血液中核酸检测检出有HBV-DNA核酸反应性样本占绝大多数；年龄更大的无偿献血者血液标本核酸的阳性检出率相对年龄较低的无偿献血者更高。