目的探究甲氨蝶呤联合R-CHOP化疗方案对弥漫大B细胞淋巴瘤患者的治疗价值。方法选取2022年4月至2024年12月期间医院收治的64例弥漫大B细胞淋巴瘤患者作为研究对象，按照抽签法分为参照组和试验组，每组32例。参照组采用R-CHOP化疗方案治疗，试验组采用甲氨蝶呤联合R-CHOP化疗方案治疗。比较两组患者在肿瘤标志物、T细胞亚群水平、临床疗效及不良反应方面的差异。结果治疗后，两组乳酸脱氢酶（LDH）、β?-微球蛋白指标（β?-MG）及循环肿瘤DNA（ctDNA）水平均较治疗前显著降低（P<0.05），试验组LDH、β?-MG及ctDNA水平均低于参照组（P<0.05）。治疗前后，两组患者CD4+、CD3+T细胞及CD4+/CD8+T细胞比值比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。试验组客观缓解率及疾病控制率均高于参照组（P<0.05）。两组肝肾功能异常、脱发、骨髓抑制及胃肠道反应的发生情况比较，均无统计学差异（P>0.05）。结论在弥漫大B细胞淋巴瘤的治疗中，采用甲氨蝶呤联合R-CHOP化疗方案，能够更有效地降低患者肿瘤标志物水平，提高客观缓解率与疾病控制率，且未明显影响机体主要T细胞亚群水平，安全性良好，具有积极的临床应用价值。