目的探讨血清脑钠肽前体（NT-proBNP）、D-二聚体（D-D）联合高敏肌钙蛋白I（hs-cTnI）在急诊胸痛患者中鉴别急性心肌梗死（AMI）与急性肺栓塞（APE）的诊断效能。方法回顾性选取2024年1月至2025年12月因急性胸痛于昭通市第一人民医院就诊的100例患者，根据最终的诊断结果，将患者分为两组，其中AMI组50例，APE组50例。比较两组患者入院首诊时的血清NT-proBNP、D-D及hs-cTnI水平。以AMI为阳性、APE为阴性，绘制受试者工作特征（ROC）曲线，计算各单项指标及联合指标的曲线下面积（AUC）、灵敏度及特异度，评价其鉴别诊断效能。结果AMI组血清hs-cTnI及NT-proBNP水平均显著高于APE组，APE组血浆D-D水平显著高于AMI组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。ROC曲线分析显示，hs-cTnI鉴别诊断AMI的效能最优，AUC为0.963（95%CI：0.927～0.998），取截断值≥0.16ng/mL时，灵敏度和特异度分别为94.37%和92.18%；D-D以低值阳性方向鉴别AMI，AUC为0.919（95%CI：0.865～0.973），取截断值≤1.87mg/L时，灵敏度和特异度分别为86.29%和84.16%；NT-proBNP的AUC为0.875（95%CI：0.807～0.943），取截断值≥681.54pg/mL时，灵敏度和特异度分别为82.43%和80.27%；3项联合鉴别诊断AMI的AUC为0.982（95%CI：0.951～0.999），当联合预测概率截断值取≥0.52时，灵敏度及特异度分别为96.00%和94.00%。结论血清NT-proBNP、D-D及hs-cTnI对鉴别AMI与APE均具有较高诊断价值，联合诊断可进一步提高诊断效能，可用于急诊胸痛患者的早期鉴别诊断。