目的通过检测0～6岁儿童血清25-羟基维生素D［25(OH)D］水平，了解济宁地区该年龄段儿童维生素D营养状况，为儿童佝偻病的防治、维生素D缺乏的评估及合理补充维生素D提供科学依据。方法选取2025年1—12月在济宁医学院附属医院进行健康体检的2265名0～6岁儿童为研究对象，采用人25(OH)D3检测试剂盒检测血清25(OH)D3水平［以25(OH)D3近似代表总25(OH)D］；统计不同年龄组儿童25(OH)D3水平以及维生素D缺乏情况；比较不同性别及不同季节儿童血清25(OH)D3水平的差异。结果2265名儿童的血清25(OH)D3水平为（32.58±12.17）μg/L，维生素D缺乏率为8.79%。各年龄组间儿童血清25(OH)D3水平、维生素D缺乏率比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。＞4～5岁组男童25(OH)D3水平为（26.48±7.89）μg/L，显著高于女童的（23.47±8.09）μg/L（P＜0.05）；不同季度儿童血清25(OH)D3水平总体比较差异有统计学意义（P＜0.05）；两两比较显示，第3季度水平显著高于第1、4季度（P＜0.05），与第2季度比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论维生素D是儿童生长发育必需的营养元素，血清25(OH)D作为评估机体维生素D营养状态的核心指标，应定期监测。儿童维生素D补充方案需结合不同年龄段发育特征与本地季节特点个体化制订，重点加强学龄前儿童健康宣教。